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2D Micro-HPLC系統(tǒng)進行蛋白質(zhì)組分析
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需要高生產(chǎn)率高性能的蛋白質(zhì)組分析 特征 1. 在二維凝膠電泳中不能分析的蛋白質(zhì)在此儀器中可進行分析。 高離子蛋白和疏水性蛋白質(zhì)可在線分析。 2. 低顯示水平的蛋白質(zhì)可進行高分離度和高靈敏度的自動分析。 蛋白質(zhì)消化物可置于自動采樣器中進行自動分析。其靈敏度可滿足痕量肽分析要求,而在2-D凝膠中是不可檢測的。 3. 在線樣品捕集和隨后RPHPLC進行的自動化脫鹽可確保穩(wěn)定的分析。 陽離子交換柱中的樣品在6個迷你捕集柱中捕集(反相柱中的聚合物的保留力等同于C4)并伴隨后續(xù)的反相分離進行脫鹽。此方法確保了穩(wěn)定高精準分析。 分析實例 此分析結(jié)果為6種蛋白質(zhì)(1 pmol)混合物胰蛋白酶消化的分析結(jié)果,如下圖3所示。 為了對比區(qū)分,最上面的色譜圖為1D LC-MS的分析結(jié)果,最底端交疊的色譜是二維分析中反相LC-MS的分析結(jié)果。在一維分析中對每一種蛋白質(zhì)的分析。從中可見,運用此系統(tǒng)可大大改進肽的分離度水平。 初級洗脫使用的鹽是硫酸銨。每一個消化物的濃度分別為1mM, 10 mM, 20 mM, 30 mM, 50 mM和 99 mM。
根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究所,美國心理健康研究所與島津達成的CRADA協(xié)議,島津公司一直致力于參與蛋白質(zhì)組分析的多維HPLC系統(tǒng)的聯(lián)合研發(fā)過程。 CRADA: NIMH: |
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